《表2 不同处理组红色荧光/绿色荧光相对表达量》

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《健脾消积方水提物对人肝癌SMMC7721细胞自噬的调控机制》

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注:与对照组比较，1)P<0.001。

随着自噬的发生，LC3带动SensGFP和StubRFP荧光蛋白聚集在自噬相关的双层膜结构中，并在共聚焦显微镜下形成荧光点。在自噬体对应的荧光点中，Sens GFP和StubRFP各自发出绿色和红色的荧光。在自噬溶酶体对应的荧光点中，虽然Sens GFP、StubRFP和LC3均存在，但由于Sens GFP在酸性环境中荧光易淬灭，因此仅存在StubRFP发出的红色荧光[15-17]。细胞中红色荧光点的数目代表自噬体和自噬溶酶体的总数量，绿色荧光点的数目代表自噬体的数量，两者的相对数量代表自噬流从自噬体到自噬溶酶体的流动速度。与对照组相比，加药组（1500μg/ml和2100μg/ml组）的红色荧光点和绿色荧光点明显增多（P值均<0.05）。合并图像中，黄斑点均显著增加，呈现红色的自由红色斑点减少（图2）。相比对照组组，两个加药干预组红色荧光/绿色荧光相对值显著下降，差异均有统计学意义（P值均<0.001）（表2）。提示健脾消积方药物可能抑制了自噬体向自噬溶酶体的流动。