《表2 ISTR引物序列：ISTR标记在榧树种质资源遗传多样性分析中的应用》

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《ISTR标记在榧树种质资源遗传多样性分析中的应用》

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采用十六烷基三甲基溴化铵法（cetyltrimethylammonium ammonium bromide，CTAB）提取榧树叶片DNA，DNA终浓度稀释至10 ng/μL备用。ISTR扩增及其产物检测参考Rohde的方法并作优化[8]。引物序列参考Aga等的报道[12]（表2），由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增体系（20μL）:模板DNA（2μL），Buffer 1×（5μL），Mg2+2.5×10-3mol/L（5μL），dNTP 2.5×10-3mol/L（5μL），Taq酶1 U（1μL），引物1.0×10-6mol/L（2μL）。扩增程序:94℃5 min；94℃1 min，50℃1 min，72℃1.5 min，循环35次；72℃延伸5 min。扩增产物经2.0%琼脂糖凝胶电泳检测，用SYNGENE凝胶成像系统观察和记录谱带。