《表1 引物序列及其产物长度》

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《Beclin-1在稽留流产中的表达模式及临床意义》


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分别取稽留组及对照组绒毛及蜕膜组织20 mg。Trizol法提取总RNA,检测总RNA纯度、浓度及完整性,按反转录试剂盒(GENEray,GK8030)说明书进行反转录,然后以c DNA为模板,以无RNA酶的DEPC水作阴性对照,样品及阴性对照均设3个复孔。PCR扩增反应条件:95℃,预变性10 min,95℃变性10 s,循环数40次,60℃退火延伸34 s,共40个循环。PCR引物由上海生工生物工程技术服务有限公司设计并合成,见表1。记录扩增曲线和熔解曲线,根据扩增曲线,得到每个样本的Ct值,采用2-ΔΔCt法计算mRNA的相对表达量。