《表1 5种改良CTAB法提取的花生基因组DNA的质量比较》

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《花生DNA的五种改良CTAB提取方法的比较分析及其应用》


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利用5种改良CTAB法提取出来的花生基因组DNA的浓度和纯度分别通过Quawell3000紫外分光光度计检测。结果显示,方法一连续2次使用氯仿抽提后沉淀DNA,所得DNA的A260/A280比值和A260/A230比值分别为1.795和1.725,由此可见,采用方法一提取得到的DNA中的蛋白质、RNA及多糖污染较轻,DNA质量较好。方法五和方法四的DNA提取效果也较好,中间DNA沉淀前后分别使用了氯仿和平衡酚(平衡酚和氯仿)抽提后最终沉淀DNA,发现方法五提取所得DNA的A260/A280比值和A260/A230比值分别为1.727和1.939,方法四提取所得DNA的A260/A280比值和A260/A230比值分别为1.771和1.932,由此可见,采用这2种方法提取得到的最终DNA中的蛋白质、RNA及多糖污染轻,但这2种方法因均利用到强腐蚀性的平衡酚,不安全且不环保,故不推荐。方法三和方法二的提取效果较差,在直接使用平衡酚抽提后沉淀DNA发现,方法三提取所得DNA的A260/A280比值和A260/A230比值分别为1.678和1.094,方法二提取所得DNA的A260/A280比值和A260/A230比值分别为1.525和1.239。由此可见,采用这2种方法提取得到的最终DNA中存在较严重的蛋白质、RNA及多糖污染现象,而且因其有利用到强腐蚀性的平衡酚,不安全且不环保,故亦不推荐(表1)。