《表1 引物设计：冠心病患者血浆囊泡中miR-132表达的分析》

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《冠心病患者血浆囊泡中miR-132表达的分析》

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收集所有对象入院时血液样品10 m L，枸橼酸钠抗凝。采用Trizol法[7]提取总RNA，首先将血液样品4℃下3 000 r/min离心15 min，以去血细胞及碎片，继续离心收集上清液，以磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS）重悬，后进行沉淀RNA，并洗涤、溶解，以无RNA酶（Rnase-free）的DNA酶Ⅰ（DnaseⅠ）配置反应液，37℃下消化30 min，65℃灭活10 min，离心，混匀，溶解。取1μL RNA样品稀释1倍，于微量分光光度计（凯奥k2800）上测定光密度（optical density，OD）值。继续进行逆转录、定量PCR。溶解曲线分析:60～95℃，每1 min读取1次。引物设计见表1。