《表1 引物设计：miR-499对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响》

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《miR-499对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响》

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引物设计见表1，miR-499上下游引物及U6上下游引物由广州锐博生物科技有限公司设计合成；采用Trizol提取实验各组心肌细胞总RNA，检测RNA浓度，按试剂盒说明书逆转录为c DNA，再行荧光定量PCR。PCR反应条件:95℃30s预变性；95℃5 s，60℃30 s，共40个循环；95℃5s，60℃60 s，95℃融解；50℃30 s降温。采用2-ΔΔCT法计算PI3K、miR-4991 mRNA的表达水平。实验均重复5次。