《表1 酶解效果表:利用LB膜技术的胶原覆层生物材料制备与表征》
为实现胶原蛋白肽分子量可控均一,分别比较了胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶的酶解效果,在酶本身最适pH条件下,酶解至分子量不发生明显变化,检测其酶解后分子量分布(分子量计算依据图1中的标准曲线),结果见表1。从表中结果可以看出不同的酶对胶原蛋白的酶解效果不尽相同,然而均未能达到控制其分子量在200~5 000 Da的预期效果。胰蛋白酶酶解速度最快,1 h酶解结束,而碱性蛋白酶是这几种蛋白酶中酶解后分子量最小的。因此,将这2种最适pH为8.0的蛋白酶混合,经条件优化发现胰蛋白酶。碱性蛋白酶为2∶5时,2种酶同时作用可以在1 h内将胶原蛋白酶解至200~5 000 Da(凝胶过滤色谱检测结果见图2)。碱性蛋白酶酶切位点为Ala、Leu、Val、Tyr、Phe、Try,胰蛋白酶酶切位点为Arg、Lys,这2种酶的酶切位点无重叠,从而在酶解过程中协同作用,实现了快速高效酶解。
图表编号 | XD002456000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.05 |
作者 | 邱宁 |
绘制单位 | 青岛理工大学琴岛学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |