《表1 引物序列：健脾消癌方对结肠癌外泌体诱导HFL1活化成CAFs的影响》

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《健脾消癌方对结肠癌外泌体诱导HFL1活化成CAFs的影响》

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采用六孔板培养HFL1细胞，将收集的HCT116外泌体及健脾消癌外泌体干预HFL1细胞，具体方法同2.5项，根据trizol试剂说明收集各组细胞的总RNA，并取适量RNA样品采用Biodrop仪器检测各组RNA浓度，计算加样量。采用逆转录试剂盒行逆转录，反应条件：42℃2 min，37℃15 min，85℃5 s，冷却后将c DNA进行PCR反应，反应条件：95℃预变性4 min，1个循环；94℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸1 min，共40个循环。GAPDH为内参，实验结果采用2-ΔΔCt法计算各组CAFs相关α-SMA m RNA相对表达。引物由生工生物工程（上海）股份有限公司设计合成。见表1。