《表1 引物序列:间充质干细胞外泌体上调Mir-21调控HO-1机制促进椎间盘退变的修复》
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《间充质干细胞外泌体上调Mir-21调控HO-1机制促进椎间盘退变的修复》
把椎间盘组织放到液态氮中进行保存,加入1 mL Trizol试剂比例,放在玻璃匀浆器中匀浆,组织完全融化,进行RNA提取,加入细胞裂解液100μL,放置5 min,进行吹打,PBS洗涤2次,再放入EP管中,3组个加入100μL氯仿,混匀,静置5 min,进行离心处理,离心10 000 g,5 min,去上清,加入1 m L无水乙醇,Mir-21组中注入400μg/mL的外泌体悬液溶液,离心10min后去上清,各取2μL RNA为样品,GAPDH为内参,Mir-21、HO-1、BACH1合成引物序列,计算RNA的浓度,并提取RNA进行逆转录聚合酶链反应,PCR反应条件:在95℃下预变性3 min和在95℃下变性35个循环,持续15 s,在60℃30 s,72℃延伸30 s。引物序列如表1。
图表编号 | XD00153818800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.04.25 |
作者 | 龚东亮、付文芹 |
绘制单位 | 复旦大学附属中山医院青浦分院骨科、复旦大学附属中山医院青浦分院骨科 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |