《表1 miR-30c引物序列》

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《糖尿病肾病患者外周血微小RNA-30c表达与肾间质纤维化的关系》

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抽取所有受试者静脉血1 ml，1 000 r·min-1离心10 min，取上层血清，使用血液miRNA快速提取试剂盒（美国基因公司）提取miRNA，使用逆转录试剂盒（北京碧云天生物科技有限公司）反转录出c DNA第一链，每个样品取1μg c DNA模板，以U6为内参，使用荧光定量PCR试剂盒（大连Ta KaRa公司）检测miR-30c相对表达水平。miR-30c和内参U6扩增引物由上海吉凯基因化学技术有限公司设计与合成，序列见表1。PCR反应条件:94℃2 min；94℃30 s，61℃30 s，30个循环；72℃10 min，美国Applied Biosystems公司生产7500荧光定量PCR仪实时动态检测荧光值变化，对照内参U6，以2-ΔΔCt值表示miR-30c表达水平。