《表2 RNA浓度及纯度测定》

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《miR-381在HPV感染型宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响》

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RNA提取:（1）向加有Trizol的1.5 m L EP管中加入200μL氯仿，震荡混匀后，静置5 min，在12 000r·min-1，4℃离心10 min。（2）从离心机中取出1.5m L EP管，再将上层无色透明的水相层吸入到另一干净的1.5 m L EP管中（样品会分为3层:下层有机相层，中间层和上层的水相层，RNA位于上层水相中），加入等体积的异丙醇，上下轻轻颠倒混匀之后，静置10 min，再12 000 r·min-1，4℃离心10 min。（3）离心之后可在EP管壁或管底看到胶状沉淀出现，沉淀即为要提取的RNA。小心弃去上清，不要将沉淀倒掉。（4）用1 m L 75℅乙醇对RNA沉淀进行洗涤。然后于4℃7 000 r·min-1离心5 min，将上清尽量去除干净。（5）室温静置干燥，5～10 min即可（不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低）。所有EP管中加入25μL的DEPC H2O，用枪头吹打几次，使RNA充分溶解，-80℃保存。（6） RNA浓度检测:使用核酸蛋白检测仪检测RNA浓度。引物设计及RNA浓度与纯度测定见表1和表2。