《表1 沸水浴对提取的菠菜DNA浓度和吸光度的影响》

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《碱解法快速提取菠菜基因组DNA方法的优化》


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样品研磨后常温与沸水浴的DNA浓度差异不显著,并且常温处理的浓度还稍高,但是沸水浴显著提高了菠菜提取的DNA的得率(表1)。2个处理的DNA浓度与得率似乎不一致,这是因为两者的稀释倍数不同,沸水浴的稀释倍数是常温的2倍。常温处理提取的DNA的A260/A280显著大于沸水浴处理,但是两者都小于1.80,表明所提的DNA纯度不高,存在蛋白质、酚类等污染。沸水浴处理提取的DNA的A260/A230显著高于常温处理,表明沸水浴改善了所提DNA的纯度。A260/A230值明显比相应的A260/A280低,也表明样品中还存在糖类和盐类等其他污染[15-16]。PCR扩增效果是评价提取效果优劣的关键指标。沸水浴提取的DNA的PCR扩增效果明显好于常温处理(图1),这与沸水浴处理的A260/A230比值较高一致。常温提取时PCR扩增条带的亮度也与标准DNA(M)相似,表明常温提取的DNA也能达到PCR扩增的需要,但是与沸水浴处理相比存在明显的劣势。