《表2 不同提取液对菠菜DNA提取浓度和纯度的影响》
注:同列数据后不同的小写或大写英文字母表示差异显著或极显著。
为了进一步简化菠菜DNA提取程序,研究了不经研磨、直接用PCR扩增仪代替水浴的可行性。前期试验表明,提取液中加入吐温20可以明显改善PCR扩增效果,本次试验比较了提取液中Na OH和吐温20的浓度,分别用2个Na OH浓度(0.9、0.4 mol/L)和2个吐温20浓度(1%、0.5%)配制4种提取液,得到了满意的PCR扩增效果。4种提取液对提取的菠菜DNA的浓度、得率和A260/A280都没有显著影响,对A260/A230有极显著的影响,Na OH浓度为0.4 mol/L时提取的菠菜DNA的A260/A230极显著高于Na OH浓度为0.9 mol/L(表2)。4种提取液提取的菠菜DNA的PCR扩增效果明显不同(图2),Na OH浓度为0.4 mol/L时,提取的菠菜DNA的扩增效果明显好于Na OH浓度为0.9 mol/L时。吐温20的浓度对PCR扩增效果也有明显影响,在2个Na OH浓度下均是吐温20浓度为0.5%时的扩增效果较好,吐温20浓度为1%时扩增效果稍差。所以,0.4 mol/LNa OH+0.5%吐温20是比较理想的提取液。
图表编号 | XD00217217800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.12.25 |
作者 | 孙稚成、孙兆法、段玉军、程斐 |
绘制单位 | 华南农业大学兽医学院、青岛市农业科学研究院、青岛市农业科学研究院、青岛农业大学园艺学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |