《表3 PA1~PA10碱裂解液提取DNA浓度与纯度及电泳结果》
由图1可知,通过10种不同的碱裂解液所提DNA经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,都能扩增出条带,以PA5扩增出的条带最成功、最清晰。10种碱裂解液中分别用到了SDS、PVP、PVPP、PEG、曲拉通100、EDTA、NaCl、Tris-HCl等试剂,在DNA提取中具有不同的作用。PA5裂解液中用到了PVP、EDTA、曲拉通100等,并用Tris-HCl为中和剂,PCR扩增后电泳图结果较好,DNA浓度稍低,但OD值为1.84,接近纯品DNA(如表3所示)。这可能与裂解液中PVP等有关,有文献[10]报道PEG、PVP可降低DNA浓度。但整体而言,以Tris-HCl为中和剂的裂解液比以醋酸钠为中和剂的裂解液所得DNA浓度及纯度好。因此选择PA5碱裂解液作为川贝母DNA提取液,并对1号样品进行PCR-RFLP反应和电泳检测,结果见图2。
图表编号 | XD00105987200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.09.01 |
作者 | 陈玉秀、彭必武、李雨嫣 |
绘制单位 | 湖南食品药品职业学院、湖南食品药品职业学院、湖南食品药品职业学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |