《表3 PA1~PA10碱裂解液提取DNA浓度与纯度及电泳结果》

《表3 PA1~PA10碱裂解液提取DNA浓度与纯度及电泳结果》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《基于碱裂解法川贝母的鉴别》


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由图1可知,通过10种不同的碱裂解液所提DNA经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,都能扩增出条带,以PA5扩增出的条带最成功、最清晰。10种碱裂解液中分别用到了SDS、PVP、PVPP、PEG、曲拉通100、EDTA、NaCl、Tris-HCl等试剂,在DNA提取中具有不同的作用。PA5裂解液中用到了PVP、EDTA、曲拉通100等,并用Tris-HCl为中和剂,PCR扩增后电泳图结果较好,DNA浓度稍低,但OD值为1.84,接近纯品DNA(如表3所示)。这可能与裂解液中PVP等有关,有文献[10]报道PEG、PVP可降低DNA浓度。但整体而言,以Tris-HCl为中和剂的裂解液比以醋酸钠为中和剂的裂解液所得DNA浓度及纯度好。因此选择PA5碱裂解液作为川贝母DNA提取液,并对1号样品进行PCR-RFLP反应和电泳检测,结果见图2。