《表2 碱裂解液配方：基于碱裂解法川贝母的鉴别》

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《基于碱裂解法川贝母的鉴别》

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N:0.5mol/L氢氧化钠；PVPP:1%聚乙烯聚吡咯烷酮40；NaCl:200mmol/L氯化钠液；MgCl2:5mmol/L氯化镁液；EDTA:2mmol/L乙二胺四乙酸液；SDS:1%十二烷基硫酸钠；PEG:40%聚乙烯二醇4000；Tr:1%曲拉通100；PVP:1%聚乙烯吡咯烷酮；Ac：醋酸钠液；Tris:10mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸液。

碱裂解液的配置参照表2。取1号川贝母样品10份各30mg于1.5mL离心管中，分别加入PA1～PA10提取缓冲液400μL及RNaseA 0.5μL，用漩涡振荡器振荡10～15s，混匀，65℃水浴加热5min，取出。在PA1～PA5缓冲液管中分别加入0.1 mol/L Tris-HCl（pH 8.0）130μL，在PA6～PA10缓冲液管中分别加入0.3mol/L NaAc（pH 5.0）130μL。分别经漩涡混匀，冰浴冷却3min，14 000r/min离心3min；吸取上清液转移至另一离心管中，加入等体积（含6.0mol/L氯化铜溶液，pH 5.5）25mmol/L MES液，5mmol/L MgCl2液及0.05%Triton X-100混合溶液，混匀，加到吸附柱上，10 000r/min离心1min，弃过滤液，加入5 mol/L盐酸胍、25 mmol/L MES、2 mmol/L氯化镁溶液及0.05%Triton X-100混合溶液500μL，10 000r/min离心1min，弃过滤液；再加入Tris-Base缓冲液500μL，10 000r/min离心1min，弃过滤液；取出吸附柱，放入另一离心管中，加入50μL洗脱缓冲液，室温放置3min，10 000r/min离心1 min，将洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2 min，10 000r/min离心1min，取洗脱液，在核酸定量仪上测定浓度与纯度。