《表1 扩增g DNA的引物》

《表1 扩增g DNA的引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《阳春砂3个萜类合酶基因启动子的克隆及其参与萜类调控的分析》


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以阳春砂叶片g DNA为模板,使用Primer STAR高保真酶对Av BPPS、Av LIS和Av HUS编码区的g DNA序列进行PCR扩增,引物与从c DNA中克隆基因编码区的引物一致(表1)。PCR扩增条件:98℃,预变性5 min;98℃,变性10 s,按相应退火温度退火30 s,72℃,延伸2.5 min,30个循环;最后72℃延伸5 min。将PCR产物纯化后连接至p LB载体,并转化至E.coli DH5α,进行菌落PCR筛选阳性重组子并测序获得Av BPPS、Av LIS和Av HUS的g DNA序列。利用Clustal Omega(http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo/)和DNAMAN软件,将测序结果分别与已获得的Av BPPS、Av LIS和Av HUS序列比对,确定其g DNA序列后,登录Gen Bank https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/submit/,用Bank It提交g DNA序列。