《表1 扩增g DNA的引物》
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《阳春砂3个萜类合酶基因启动子的克隆及其参与萜类调控的分析》
以阳春砂叶片g DNA为模板,使用Primer STAR高保真酶对Av BPPS、Av LIS和Av HUS编码区的g DNA序列进行PCR扩增,引物与从c DNA中克隆基因编码区的引物一致(表1)。PCR扩增条件:98℃,预变性5 min;98℃,变性10 s,按相应退火温度退火30 s,72℃,延伸2.5 min,30个循环;最后72℃延伸5 min。将PCR产物纯化后连接至p LB载体,并转化至E.coli DH5α,进行菌落PCR筛选阳性重组子并测序获得Av BPPS、Av LIS和Av HUS的g DNA序列。利用Clustal Omega(http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo/)和DNAMAN软件,将测序结果分别与已获得的Av BPPS、Av LIS和Av HUS序列比对,确定其g DNA序列后,登录Gen Bank https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/submit/,用Bank It提交g DNA序列。
图表编号 | XD00215766600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2021.02.28 |
作者 | 赵海莹、李萌、林晓静、赵圆圆、梁慧琳、叶泽萍、杨锦芬 |
绘制单位 | 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室、广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室、广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室、广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室 |
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