《表2 虫生真菌DNA的PCR扩增引物》

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《29株虫生真菌的鉴定及对烟粉虱的毒力》

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ITS序列、Bloc序列、TEF序列的PCR扩增均采用通用引物，详细引物信息见表2。PCR反应体系为25μL体系，其中dd H2O 10μL，2×Taq PCR Star Mix 12μL，上下游引物各1μL，DNA模板1μL。ITS扩增条件：94℃5 min；94℃1 min，55℃1 min，72℃1 min，35个循环；72℃延伸10 min。Bloc扩增条件：95℃5 min；95℃30 s，54℃30 s，72℃80 s，40个循环；72℃延伸15 min。TEF扩增条件：TEF采用降落PCR的扩增方式，95℃5 min；95℃30 s，66℃30 s，72℃1 min，每个循环退火温度降低1℃，11个循环；95℃30 s，56℃30 s，72℃1 min，35个循环；72℃延伸10 min。将目的条带大小合适样品的纯化回收产物送上海美吉生物医药科技有限公司进行序列测定。利用软件Geneious进行序列拼接，进行Blast序列相似性搜索，采用软件MEGA 7.0构建系统进化树。