《表1 CESI-MS/MS和NanoLC-MS/MS鉴定到的糖肽信息(n=3)》
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《CESI-MS/MS和NanoLC-MS/MS技术对促红细胞生成素中糖肽的分析》
注(note):*同一条肽段中含有多个糖基化位点,糖基修饰位点不确定(the same peptide has multiple glycosylation sites,which are uncertain in peptide);A.N-乙酰葡糖胺(N-acetylhexosamine);F.岩藻糖(fucose);G.半乳糖(galactose);S.唾液酸(sialic acid);M.甘露糖(m
采用商品化的BiopharmaViewTM 3.0软件进行糖肽的谱图解析,首先将EPO的氨基酸序列导入软件,将相关的N-糖基修饰作为预设蛋白翻译后修饰来定义EPO蛋白的修饰信息,同时配对EPO的二硫键。在软件中选择IAM进行半胱氨酸烷基化处理和胰蛋白酶酶解,在还原状态下产生EPO胰蛋白酶酶解后的理论肽段信息。将采集得到的原始数据(wiff格式)导入BiopharmaViewTM 3.0软件,进行自动搜索,通过肽段质量数可确定EPO的糖肽信息,并给出具体的糖型和糖基化位点信息。利用CESI-MS/MS方法对EPO的酶解产物连续3次进行分析,通过BiopharmaViewTM 3.0进行解析,可以准确鉴定到44条相同糖肽(如表1),涉及到的糖型有A2F、A4G4S4、FA2G2S2、FA3G3S1、FA3G3S2等共计-630种。所有鉴定到的糖肽质量误差均在8×10下。
图表编号 | XD00214904100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2021.01.31 |
作者 | 张伶俐、王文涛、赵颖华、肖志良、罗继、刘冰、董衍东、李响、陈泓序 |
绘制单位 | 重庆市食品药品检验检测研究院、SCIEX中国、SCIEX中国、SCIEX中国、SCIEX中国、重庆市食品药品检验检测研究院、重庆市食品药品检验检测研究院、中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室、SCIEX中国 |
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