《表1 CESI-MS/MS和NanoLC-MS/MS鉴定到的糖肽信息(n=3)》

《表1 CESI-MS/MS和NanoLC-MS/MS鉴定到的糖肽信息(n=3)》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《CESI-MS/MS和NanoLC-MS/MS技术对促红细胞生成素中糖肽的分析》


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注(note):*同一条肽段中含有多个糖基化位点,糖基修饰位点不确定(the same peptide has multiple glycosylation sites,which are uncertain in peptide);A.N-乙酰葡糖胺(N-acetylhexosamine);F.岩藻糖(fucose);G.半乳糖(galactose);S.唾液酸(sialic acid);M.甘露糖(m

采用商品化的BiopharmaViewTM 3.0软件进行糖肽的谱图解析,首先将EPO的氨基酸序列导入软件,将相关的N-糖基修饰作为预设蛋白翻译后修饰来定义EPO蛋白的修饰信息,同时配对EPO的二硫键。在软件中选择IAM进行半胱氨酸烷基化处理和胰蛋白酶酶解,在还原状态下产生EPO胰蛋白酶酶解后的理论肽段信息。将采集得到的原始数据(wiff格式)导入BiopharmaViewTM 3.0软件,进行自动搜索,通过肽段质量数可确定EPO的糖肽信息,并给出具体的糖型和糖基化位点信息。利用CESI-MS/MS方法对EPO的酶解产物连续3次进行分析,通过BiopharmaViewTM 3.0进行解析,可以准确鉴定到44条相同糖肽(如表1),涉及到的糖型有A2F、A4G4S4、FA2G2S2、FA3G3S1、FA3G3S2等共计-630种。所有鉴定到的糖肽质量误差均在8×10下。