《表2 单拷贝转基因家系草甘膦抗性分离鉴定》

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《新型抗广谱性除草剂草甘膦转基因油菜的创制及其鉴定》

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根据T0代拷贝数检测结果，同时结合它们后代株系的田间表现，选择具有1～2个拷贝的优良株系的后代进行了拷贝数验证。分别采用Hind III和Eco R I 2种酶切、EPSPS基因和Ca MV 35S启动子2种探针（探针位置见图1所示）对它们的T2和T3代阳性株系进行Southern blot检测，证实这些家系的拷贝数与T0代检测结果一致（图4）。进一步选择4个具有单拷贝插入的株系进行了T1代除草剂抗性分离的检测，即苗期使用田间推荐浓度的2倍草甘膦进行处理，结果可以看出这些家系的存活单株与死亡单株符合3∶1的分离比（表2），从而进一步证实了转基因拷贝数检测结果的准确性。基于上述结果，从中挑选出3个单拷贝插入株系（EPS-2、EPS-6和EPS-7）和2个双拷贝插入株系（EPS-1和EPS-5）用于后续的试验研究。