《表3 融合蛋白质浓度的测定结果》

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《基于激光共聚焦显微镜的绿色荧光融合蛋白质微米环形貌分析》

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获得融合蛋白质的微米环表达载体后，改变融合蛋白质浓度，对蛋白质微米环的表达条件进行优化.根据融合蛋白质分子量的大小选取浓度为10%的凝胶，按照所需各试剂比例对凝胶进行配制[8].然后对融合蛋白质进行纯化，保证纯化柱底端密封，将融合蛋白质的移液管颠倒振荡，加入6 m L凝胶和10 m L无菌去离子水，使绿色荧光融合蛋白质自然沉降，再向纯化柱中注入1.5 m L树脂，吸出上清液，用20%乙醇做纯化柱的液封[9].加强纯化后的融合蛋白质荧光效应，在纯化柱中加入8 m L二羟基苯甲酸甲酯，使融合蛋白质与二羟基苯甲酸甲酯结合45 min，然后使二羟基苯甲酸甲酯从纯化柱低端流出，再选取8 m L 99%碳酸钾和碘化钾洗柱，让洗液从纯化柱低端流出[10].重复上述过程3次，最后竖直放置融合蛋白质的纯化柱，接收流出的绿色荧光融合蛋白质[11].采用Bradford对纯化后的蛋白质浓度进行测定，VP22融合蛋白质纯度如表3所示.