《表2 ddPCR引物/探针序列》
注:a.引物/探针位置分别参考GenBank no.AY187681.1(nplD、rpoS基因)、AY626581.1(vcgE基因)和U50548.1(met基因)序列信息。
为实现对创伤弧菌的特异性检测和绝对定量分析,分别选取创伤弧菌具有种属特异性且高度保守的单拷贝脂蛋白D基因(nplD,GenBank no.AY187681.1)、RNA聚合酶亚单位σ因子S基因(rpoS,GenBank no.AY187681.1)、毒力相关基因E(vcgE,GenBank no.AY626581.1)和金属蛋白酶基因(met,GenBank no.U50548.1)作为靶序列,通过NCBI在线工具进行序列分析和比对,利用Prime Express软件V3.0(ABI,Foster City,CA,USA)设计出4对引物和探针组合,序列见表2。探针5’端标记FAM,3’端标记BHQ。引物/探针均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。分别利用real-time PCR和ddPCR对创伤弧菌(ATCC 27562)基因组DNA进行检测,比较4组引物探针的荧光信号,并利用表2菌株验证所筛选引物探针的特异性。
图表编号 | XD00207474500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.06.25 |
作者 | 马丹、魏咏新、李丹、魏海燕、徐蕾蕊、汪琦、付溥博、张西萌、曾静 |
绘制单位 | 北京海关技术中心、北京海关技术中心、北京海关技术中心、北京海关技术中心、北京海关技术中心、北京海关技术中心、北京海关技术中心、北京海关技术中心、北京海关技术中心 |
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