《表1 引物序列：DHA脂质体对脂代谢的改善作用》

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《DHA脂质体对脂代谢的改善作用》

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等各组细胞消化后，收集各组细胞。Trizol法提取细胞中的总RNA，琼脂糖凝胶检测RNA完整性。通过测定溶液吸光值A260 nm/A280 nm比值确定所得RNA的纯度，比值1.8～2.0时用于下一步实验。按照5X All-In-One RT裂解反转录一体试剂盒进行反转录，将RNA反转成c DNA，具体方法按照试剂盒说明书进行操作。按照Eva Green Express 2X q PCR Master Mix试剂盒说明书在冰上配置20μL反应体系，该体系包括2×Master Mix 10μL，PCR Forward、Reverse Primer各0.6μL，c DNA溶液4μL，无菌水4.8 m L。设置3个复孔，使用IQ5型荧光定量PCR仪进行测定，扩增条件：95℃，10 min；95℃，15 s，60℃，20 s，95℃，15 s(45个循环）；65℃升温至95℃（0.5℃/10 s），内参基因为GAPDH，m RNA相对表达量用2-ΔΔCT法计算[24]。引物由上海生工生物工程有限公司合成；引物序列见表1。