《表1 莱茵衣藻metacaspase type I ORF克隆引物》

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《莱茵衣藻type Ⅰ metacaspase基因克隆及其参与调控程序性细胞死亡研究》

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根据NCBI GenBank数据库中莱茵衣藻type I metacaspase c DNA序列（GenBank No.XM＿001696904）设计引物，进行两步法巢式PCR克隆，引物序列见表1。使用Nucleospin Gel and PCR Clean-up试剂盒纯化第二步PCR产物，并进行poly（A）-tailing添加粘末端反应，进而将其连接到pGEM-T载体中进行蓝白斑筛选。筛选后提取质粒并送至生工生物工程（上海）有限公司进行测序、组装并输入BLAST进行验证，证实所获序列为莱茵衣藻type I metacaspase ORF序列，命名为CrMC1。