《表2 荧光探针制作反应体系》

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《基于荧光原位杂交的‘燕山红栗’核型分析》

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注:用EDTA （0.2 mol/L）终止反应，10伊Buffer:50 mmol/L Mg-Cl2+0.5 mol/L Tris-HCl （p H=7.5）

在NCBI等网站找到相关基因序列在板栗基因组中比对出45S r DNA同源序列，使用Beacon Designer 7.9设计出相关引物克隆出该基因片段，片段大小为1 200～1 500 bp之间，琼脂糖凝胶检测条带确定大小，凝胶回收纯化探针。Nanodrop One （Thermo，美国）检测纯化产物的浓度。使用荧光d UTP与d NTP混合终浓度为0.5 mmol/L以缺口平移标记法标记探针，探针大小为200～300 bp （反应体系见表2）。