《表3 产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌人工污染米饭不同浓度不同增菌时间的LAMP检测》

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《基于环介导等温扩增技术的产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌特异性检测》

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注:-表示未检出；+表示检出。

培养产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌F4810/72，人工污染米饭的接种浓度分别为2.0×100、2.0×101、2.0×102、2.0×103 cfu/g，0、2、4和6 h后分别取样品增菌液用试剂盒和煮沸法提取DNA，LAMP检出情况见表3和图3。当起始污染菌量为2 cfu/g时，37℃增菌培养6 h，用试剂盒法和煮沸法提取的DNA，都可以检出产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌。Martina(2007）等建立了产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的实时荧光定量PCR。产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌人工污染米饭，经过6 h增菌，煮沸法提取DNA，灵敏度为100 cfu/g[16]，本研究建立的LAMP体系灵敏度与其相当。张志鸿等（2014）同样建立了产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的实时荧光定量PCR，产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌人工污染米饭，经过2 h增菌，灵敏度为100 cfu/g[12]，高于本研究中的2cfu/g，但该研究需要使用特定的荧光定量PCR仪器和专业人员操作，不利于在基层检测实验室大规模推广使用，无法满足现场检测的要求。当起始污染菌量大于2.0×103 cfu/g时，不用经过增菌培养，LAMP可直接检测出产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌。Zhang(2014）等建立了产呕吐毒素和非呕吐毒素的蜡样芽胞杆菌多重PCR，人工污染食品，不用经过增菌培养，其灵敏度为3.6×103 cfu/g[17]，与本研究的灵敏度相当。