《表2 多重PCR组合的微卫星位点、荧光种类及扩增条件》

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《绵羊微卫星标记多重PCR体系的建立与应用》

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本试验首先采用梯度PCR扩增确定了19个微卫星位点的最佳扩增温度，结果表明，SRCRSP9、DYMS1、Oar CP34、OARJMP58和INRA023 5个位点的退火温度为52℃，其他14个位点的退火温度为58℃。然后依据退火温度和扩增长度，利用19对微卫星构建了3个三重PCR和5个两重PCR体系，分别命名为Multiplex set 1～8，其中Multiplex set1、Multiplex set2和Multiplex set8为三重，其余5个组合为两重PCR，多重PCR的位点组合、引物浓度以及退火温度相关信息见表2。