《表3 LAMP技术在植物病原病毒检测中的应用》

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《环介导等温扩增技术在植物病原物检测中的应用》


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水稻黑条矮缩病毒(rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)和南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)在病毒粒体形态、症状、寄主范围等方面非常相似,传统检测方法难以区分。周彤等(2012)建立了一种利用RT-LAMP技术快速检测RBSDV的方法,其检测极限是3.25×10-5μg/μL。马铃薯纺锤块茎类病毒(potato spindle tuber viroid,PSTVd)是欧洲和南美洲马铃薯检疫性病原物之一,Lenar?i?et al.(2014)建立RT-LAMP技术并对其进行检测,只需15~25 min即可得到检测结果,检测极限是100~1 000拷贝子,灵敏度是q PCR的10倍,此外LAMP检测仪器的便携性使其更适合田间检测。陈柳等(2015)利用RT-LAMP技术建立了草莓轻型黄边病毒(strawberry mild yellow edge virus,SMYEV)的检测方法,检测极限是10-5的稀释度,灵敏度是qPCR检测的100倍且耗时短。赵雪君等(2016)建立了黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)的可视化RT-LAMP检测体系,该体系操作简便且成本低,可以对多种蔬菜的CMV进行高效快速检测,适合生产上的检测。甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)能够侵染甘薯并造成严重危害,姜珊珊等(2018)建立了SPFMV的RT-LAMP快速特异性检测方法,最低可检测的RNA浓度为1.22×10-2 ng/μL,灵敏度是qPCR技术的10倍,另外,在田间样品检测中,RT-LAMP条带扩增结果与可视化检测结果一致,表明RT-LAMP快速检测方法可有效用于SP-FMV的田间检测。南芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus,ArMV)的寄主范围广,极易传播扩散,是我国的重要检疫对象之一。陈先锋等(2013)研制了针对ArMV的RT-LAMP检测试剂盒,所建立的RT-LAMP体系能在60 min完成该病毒的检测,其检测下限为10-3病毒稀释液(表3)。