《表2 添加S.cerevisiae W141上清液(对照)/添加W141-07上清液/添加1.5 g/L乙酸的ilv2基因的相对表达量》

《表2 添加S.cerevisiae W141上清液(对照)/添加W141-07上清液/添加1.5 g/L乙酸的ilv2基因的相对表达量》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《"外源添加乙酸对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)产2,3-丁二醇影响初探"》


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注:CT-ilv2表示ilv2靶基因重复检测3次的CT平均值和标准差;CT-18S表示18S-rRNA内参基因重复检测3次的CT平均值和标准差。

通过q RT-PCR技术对ilv2和bdh1在mRNA水平表达情况进行研究。根据对发酵结果分析,分别提取ILV2和BDH1酶活达到最高时间点24 h及60 h发酵液的总RNA,运用试剂盒进行cDNA第一链的合成反应,以其为模板,分别以qilv2-up和qilv2-down、qbdh1-up和qbdh1-down、18S-up和18S-down为特异性引物进行qRT-PCR扩增,从而得到添加S.cerevisiae W141上清液(对照)、添加S.cerevisiae W141-07上清液及添加1.5 g/L乙酸的各样品ilv2及bdh1基因的扩增曲线和熔解曲线(图7)。由图可以看出,无非特异性扩增及引物二聚体的形成。获得各样品的CT值用相对定量2-△△CT法进行分析,计算出2个基因在m RNA水平的相对表达量(表2、表3、图8和图9)。