《表5 金银花各多糖成分对Vero细胞的TC50值》

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《金银花多糖的指纹图谱及体外抗病毒活性研究》

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取Vero细胞适量，经胰酶消化后，按1×104个/孔接种于96孔板中，培养过夜。依据前期预试验结果，将总多糖、80%醇沉多糖、50%醇沉多糖、20%醇沉多糖分别用RPMI 1640培养基从80g/L起以2倍比连续稀释共10个梯度后，按每孔100μL分别转移至细胞中；同时设细胞对照组（含完全培养基100μL）和利巴韦林阳性对照组（用完全培养基稀释的利巴韦林药液100μL；依据前期预试验结果，从250μg/m L起以2倍比连续稀释共10个梯度）。每组设4个复孔。细胞培养24 h后，按“2.8.3”项下MTT法使用酶标仪于492 nm波长处测定各孔OD值，按公式（1）计算细胞存活率，并根据Reed-Muench法（公式（4）)[18]计算药物对细胞的半数中毒浓度（TC50），结果见表5。由表5可见，4种多糖样品的TC50值分别为11.67、11.29、12.04、12.83 g/L，因此确定多糖的最大无毒浓度为20 g/L[19]。