《表2 不同视网膜消化方法结果》

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《糖尿病小鼠视网膜脉管系统分离铺片技术的改进与注意事项》

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（1）胰蛋白酶消化法：3%和5%胰蛋白酶，消化残存组织过多，神经胶质细胞和其他细胞，还有部分纤维结缔组织均不能消化透彻，光镜下大部分区域组织完整，无法观察到暴露的视网膜血管（图1A、1B）；8%胰蛋白酶消化，在未施加外力吹打的情况下，光镜下组织明显“破开”、松散，露出藏于组织里的脉管网（图1C）。蒸馏水中用1 ml移液枪反复吹打，借助细密的水流冲击，消化松散的组织可完全脱落，肉眼可见薄而清透的脉管网，HE染色后可见清晰完整的视网膜脉管系统呈树枝枝样分布，内皮细胞及周细胞清晰可见。（2）胃-胰蛋白酶联合消化法：5%胃蛋白酶消化30 min后，消化液内飘出大量絮状碎片，视网膜明显变小，稍稍施加外力（如用胶头滴管转移至蒸馏水），便崩解破碎。3%胃蛋白酶情况与5%相似，胃蛋白酶消化后，捞片困难，基本无法联合3%胰蛋白酶继续消化。残余视网膜铺片后，光镜下脉管系统结构完全破坏，只剩残余结缔组织。1%胃蛋白酶消化30 min后，培养皿内絮状物飘出，视网膜明显变薄变透，能保持视网膜瓣完整。但联合3%胰蛋白酶消化1 h后，HE染色光镜下血管结构依然遭到严重破坏（图1D-1F、表2）。