《表1 复方药的MIC测定结果结果》

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《中草药复方制作抑菌—消毒型湿纸巾的研究》


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(1)菌种活化:从4℃保存的大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌斜面菌株上分别取单个菌落接种于不同血培养基上扩增,备用。(2)中药的制备:将黄芩、黄连、连翘、金银花、艾叶、五倍子六种中药根据药性分为13组((1)黄芩+艾叶;(2)黄芩+五倍子;(3)黄连+黄芩;(4)艾叶+五倍子;(5)黄连+黄芩+五倍子;(6)黄连+黄芩+艾叶;(7)黄芩+五倍子+艾叶;(8)黄连+艾叶+五倍子;(9)黄芩+黄连+五倍子+艾叶;(10)黄芩+五倍子+连翘;k艾叶+五倍子+连翘;l黄连+黄芩+五倍子+金银花;m黄连+黄芩+艾叶+金银花)各组取适量水煎煮浓缩成10~20mL,配成浓度为100mg/mL的药液,标记,备用。(3)抑菌圈的测定:分别取大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌接种于琼脂培养基上,在琼脂培养基上放置好牛津杯,在牛津杯中添加准备好的13组复方药的药液。在37℃恒温培养箱中培养24h,分别测出其抑菌圈的值,记录。(4)MIC的制备:在96孔聚乙烯U形微量板中除第一列的其余孔内加入100μL肉汤培养液,在第一列孔内加入100μL药物,并依次进行二倍稀释,并将测定完成的菌液在每个孔内加入100μL。同时,在96孔板中做肉汤培养液和纯菌作为实验对照组。观察细菌的生长变化情况得出其MIC值。(5)MBC的测定:取最适的MIC孔前后共五个孔,涂抹到琼脂培养基上,做好标记,在37℃恒温培养箱中培养24h,分别观察培养基上菌落生长情况,以五个菌落以内为合格标准,记录最适结果。(6)湿纸巾的制作(将药液浸润无纺布):(1)药液:根据上述结果选取复方四:艾叶+五倍子,浓度为0.2mg/mL。(2)湿纸巾的材料:水刺无纺布。(3)主要成分:80%RO纯水(反渗透技术),20%中药提取液。(7)湿纸巾的抑菌效果测定:取20个手机,先用无菌棉签在手机表面涂抹,接种在琼脂培养基上。再用制好的湿纸巾在手机上擦拭,再用无菌棉签再次涂抹,接种于琼脂培养基上,在37℃恒温培养箱中培养24h,分别观察培养基上菌落生长情况。结果表明,用湿纸巾之前的培养基均出现大小不一,形状不同的菌落,用湿纸巾处理过的培养基除其中一个长了2个菌落,其余都没有菌落生长。(8)结果记录。