《表3.转化体系：高效组成型分泌表达木素过氧化物酶酿酒酵母工程菌的构建》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《高效组成型分泌表达木素过氧化物酶酿酒酵母工程菌的构建》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

微滴数字PCR反应包括配制体系、生成微滴、扩增循环和信号读取4个步骤。微滴数字PCR体系为20μL，包括10μL 2×dd PCR Master Mix，10μmol/L内参基因上游和下游引物各1.8μL，10μmol/L目的基因上游和下游引物各1.8μL，探针各0.5μL，基因组模板2μL。微滴的生成需要专用的微滴生成卡和微滴生成仪。将20μL PCR体系加入微滴生成卡中，并加入专用的微滴生成油后覆盖专用胶垫置入微滴生成仪，启动程序，生成微滴。微滴数字PCR扩增使用两步法，设置程序如下：94°C 10 min；94°C 30 s，55°C 60 s，45个循环，扩增结束后进行98°C、10 min的热失活。每个模板重复3个平行检测。扩增结束后，将96孔板置入微滴读取仪中读取荧光信号，并使用软件Quanta Soft V1.3.2分析实验数据，获得绝对定量结果[15–16]。