《表4 正交实验直观分析Table 4 Analysis of orthogonal experiment》

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《酸枣SSR-PCR反应体系优化》

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极差R值能反映出不同因子对PCR扩增效果的影响，极差越大说明该因子对PCR扩增效果的作用越大。由表4可知，影响酸枣SSR-PCR反应的各因素作用大小依次为dNTPs浓度、DNA模板、Taq酶、Mg2+浓度、引物浓度。各因素不同水平的作用效果由k值决定，k值越大效果越好。由表4可知，DNA模板、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶用量分别以k2、k3、k1、k4和k1最大，所以酸枣SSR-PCR的最佳反应体系的理论值为DNA模板100 ng，Mg2+浓度1.5mmol·L-1，dNTPs浓度0.3 mmol·L-1，引物浓度0.5μmol·L-1，Taq DNA聚合酶0.5U。理论值与试验设计中最佳组合比较，二者在扩增效果影响最大的2个因素（dNTPs浓度、DNA模板）上最佳浓度相同，在引物浓度上相同，在Mg2+浓度上理论值高于试验设计的最佳组合值，在Taq DNA聚合酶上理论值低于试验设计的最佳组合值。但理论上的最佳体系的效果尚需进一步的试验进行检验，综合考虑，该研究选择6号组合作为酸枣SSR-PCR反应体系。