《表2 定量反应体系：柑橘AN1基因(CsAN1)在柠檬酸积累中的作用及不同因素对其表达的影响》

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《柑橘AN1基因(CsAN1)在柠檬酸积累中的作用及不同因素对其表达的影响》

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总RNA的提取按照参照艾德莱TRIpure Reagent总RNA提取试剂盒方法，进行柑橘果肉汁胞的RNA提取方法，稍作改动。使用的cDNA合成试剂盒为TRAN公司的TransScript One-step g DNA Removal and cDNA Synthesis Super Mix试剂盒，分两步合成cDNA。编码柑橘的AN1基因CDS序列在柑橘基因组数据库中挖掘发现，AN1基因的片段引物根据分析结果设计克隆编码，使用Primer 5.0对所得到的保守序列设计qRT-PCR的引物，随后在武汉天一辉运有限公司合成，定量反应体系如表1，定量反应条件见表2。Actin基因为实时定量分析中的内参基因，序列见表3，参考雷顿（2010）的方法。