《表2 原生质体制备正交实验Table 2 The orthogonal experimental design for protoplast preparation》

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《猴头菌融合育种原生质体制备与再生条件优化》

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由表2可知，4个因素中菌龄对原生质体制备的影响最大。由极差R值可以得到，各因素对原生质体制备的影响由大到小依次为:菌龄>酶浓度>酶解温度>酶解时间；各因素对原生质体再生率的影响由大到小依次为:菌龄>酶解温度>酶解时间>酶浓度。从原生质体制备各因素的水平看，因素A以第2水平为最好，因素B以第2水平为最好，因素C以第2水平为最好，因素D以第2水平为最好，最优水平搭配为A2B2C2D2，即2.0%溶壁酶+0.5%崩溃酶，酶解时间2.5 h，酶解温度32℃，菌龄10 d。从原生质体再生率各因素水平看，因素A以第1水平为最好，因素B以第3水平为最好，因素C以第2水平为最好，因素D以第3水平为最好，最优水平搭配为A1B3C2D3，即1.5%溶壁酶+0.5%崩溃酶，酶解时间3.0 h，酶解温度32℃，菌龄12 d。原生质体制备的最佳条件不一定是原生质体再生的最佳条件，因此结合原生质体制备和再生的最优条件，取2.0%溶壁酶+0.5%崩溃酶，酶解时间2.5 h，酶解温度32℃，菌龄10 d为原生质体制备与再生的试验条件。