《表1 RACE引物使用表》

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《紫心甘薯转录因子bHLH的基因克隆及功能研究》

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以紫心甘薯“山川紫”块根的总RNA为模板，以表1中F/R引物扩增，使用PrimeScriptOne Step RT-PCR Kit Ver.2试剂盒进行RT-PCR扩增，分离目的基因的保守片段．按照SMART RACE cDNA amplification user mannul手册进行甘薯5’-cDNA与3’-cDNA的合成．根据目的基因的保守序列设计2个特异的反向引物R1和R2（巢式PCR用），采用5’-RACE技术扩增目的基因5’端的序列．同时设计2个特异性正向引物F1和F2，扩增目的基因3’端的序列．再分别以特异引物F1/R1，F2/R2和通用引物UPM组合，进行第1轮和第2轮PCR反应．RACE所用引物见表1.