《表4.DTNB分析：大肠杆菌tRNA~(Sec)关键核苷酸位点》

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《大肠杆菌tRNA~(Sec)关键核苷酸位点》

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与野生型tRNASec相比，基于突变体tRNASec的TrxR1经过表达、纯化，硒蛋白产物的酶活性呈现不同程度的降低，如图5、表4所示，其中G18和G19突变体的体积活力则更低，减少到不足野生型的30%。这些数据表明，改变G18或G19位点不利于产生高活性的硒蛋白。tRNA是一种柔性结构，某些位点的改变可能会改变tRNA的整体结构，导致tRNA减少和某些作用因子的相互作用，从而降低掺硒效率，影响硒蛋白的功能。这些结果也表明，大肠杆菌tRNASec骨架上的G18和G19基因在进化上是保守的，它们可能是维持大肠杆菌三级结构的关键核苷酸位点，我们通过突变tRNA骨架上的其他位点来寻找高活性的硒蛋白或许可以实现。