《表3 IGF-1基因引物序列及参数》

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《贵州地方黄牛IGF-1基因多态性及生物信息学分析》

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采用NCBI数据库中牛IGF-1基因的参考序列（GenBank登录号:NC＿037332.1），Premier 5.0对牛IGF-1基因第1、第2、第3、第4外显子及部分内含子设计特异性引物，引物由上海生工生物工程股份有限公司合成（表3）。PCR体系为20μL：上、下游引物各1.5μL（浓度10 pmol/μL），2×Es Taq Master Mix10μL，DNA模板2μL，ddH2O 5μL。PCR反应程序：95℃预变性3 min，95℃变性30 s，退火45 s，72℃延伸30 s，72℃终延伸5 min，35个循环。PCR产物用浓度为1%琼脂糖凝胶电泳检测，使用凝胶成像仪观察电泳结果并保存。