《表2 胰腺癌小样本组织芯片miR-21、miR-34a探针杂交条件的优化Tab 2 Optimization of hybridization conditions of miR-21 and mi

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《胰腺癌石蜡包埋组织中微RNA原位杂交检测技术的优化》

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A1-A3:Hybridization temperature（A1:48℃；A2:53℃；A3:56℃）；B1-B3:Hybridization washing conditions (B1:Washing using washing bufferⅢat 65℃for 6 min，and PBS for 1 min；B2:Washing using washing bufferⅠ，ⅡandⅢat room temperature for 5 min，respectively，a

由图1可见，miR-21以细胞核中染色为主，仅有少量在细胞质中表达；miR-21在所有癌组织中大部分肿瘤细胞中表达，而在周围基质中可见少量阳性表达；同步实验中，阴性对照和不含探针的空白对照均呈阴性表达。miR-34a的CISH结果与miR-21相似。由图1和表2可见，miR-21探针最佳杂交条件为A2B1，即杂交温度为53℃，杂交后洗涤条件为65℃下用洗涤缓冲液Ⅲ洗涤6 min、再用PBS洗涤1 min；miR-34a探针最佳杂交条件为A2B3，即杂交温度为53℃，杂交后洗涤条件为用洗涤缓冲液Ⅲ在4℃和65℃下各洗涤6 min、再用PBS洗涤1 min。