《表2 山荆子4个叶绿体基因间区的PCR扩增》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《基于叶绿体DNA变异的山荆子种质遗传多样性和系统演化》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

为保证双向测序能够测通叶绿体通用引物的扩增产物，从SHAW等[35]报道的叶绿体DNA序列中选取无回文结构的基因区间和扩增片段长度在1 500 bp以下的叶绿体通用引物，4个基因间区trn H-psb A、trn S-trn G spacer+intron、trn T-5'trn L和5'trn L-trn F对应的4对叶绿体通用引物（表1）由上海生工（Sangon）有限公司合成。50μL的PCR反应体系：DNA模板2μL，正向和反向引物（10μmol·L-1）各2.5μL，d NTP（2.5 mmol·L-1）（Ta Ka Ra，Japan）5μL，10×Buffer 5μL，Taq DNA聚合酶（5 U·μL-1)（Ta Ka Ra，Japan）0.6μL，ddH2O 32.4μL。参照VOLK等[36]报道的反应条件，对4个基因间区的PCR扩增条件进行优化（表2）。215份种质4个叶绿体间区的PCR产物用2%的琼脂糖凝胶电泳检测（图1），对于扩增成功并得到单一条带的样品直接送测序公司（上海美吉测序公司（北京））进行测序，测序仪为美国ABI 3730DNA Sequencer。每个样品在每个叶绿体DNA间区的扩增产物均进行正、反向测序，215份材料的4个间区的叶绿体DNA序列全部测通。