《表1 LMBIV-NB001株MCP基因部分序列与其他虹彩病毒的同源性比较》

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《一株大口黑鲈(Micropterus salmoides)虹彩病毒(Iridoviridae)的分离及鉴定》

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提取的病鱼肝脏、脾脏、肾脏和肌肉组织DNA分别采用引物LMBV-F和LMBV-R进行PCR扩增，均获得长度约1kb的目的条带（图4a），将其切胶回收、连接至pMD19-T simple克隆载体，转化TG1感受态细胞，涂平板培养后选取6个菌落，扩大培养后抽提质粒，进行PCR鉴定，结果如图4b所示，所选菌落的PCR扩增产物在约1kb处有明显条带，与预期结果相同。选取其中的2个阳性克隆菌落进行PCR扩增产物测序，获得长度为1029bp的序列，经NCBI数据库中BLAST比对，Bioedit软件分析，结果显示，扩增得到的序列与鳜鱼蛙病毒NH-1609、大口黑鲈溃疡综合征病毒BG/TH/CU3、EPC060608-08的MCP核苷酸同源性最高，相似度均为99.13%（表1）。系统进化分析结果表明，本研究分离得到的病毒与鳜鱼蛙病毒、大口黑鲈溃疡综合征病毒聚成一簇，属于虹彩病毒科的蛙病毒属（图5），将其命名为大口黑鲈虹彩病毒宁波分离株（Largemouth bass iridovirus，LM BIV-NB001），上传至GenBank后获得的登录号为MN176304。