《表1 本研究SSR标记的PCR引物》

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《图位克隆技术新型遗传学实验教学项目的设计与实践》

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取亲本9311、spl5突变体及其杂交F2代20个突变型单株的新鲜叶片，分别提取其基因组DNA，参考赵国珍等（2012）的方法。选取6个不同的SSR分子标记（其PCR引物序列见表1）分别对提取的DNA进行PCR扩增，可采用PCR试剂盒（如2×Taq PCR预混试剂II，天根生物），PCR体系根据产品使用说明配制。扩增程序为:94°C预变性3分钟；94°C变性30秒，55°C退火30秒，72°C延伸30秒，35个循环；72°C延伸5分钟。采用3%琼脂糖凝胶电泳30–60分钟，电压100 v。结束后，将凝胶放入Gel-red荧光染料溶液中染色5分钟，在凝胶成像仪中拍照。