《表1 羟脯氨酸标准曲线加样体系》

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羟脯氨酸标准曲线的建立:称量50 mg羟脯氨酸标准品,溶解后移入100 mL容量瓶,滴加1滴3 mol/L硫酸,定容。吸取10 mL标准储备液于1 000 mL容量瓶中定容,得到5μg/mL标准储备液。按表1加羟脯氨酸标准工作液,定容至100mL,取4 mL于具塞试管中,加入2 m L氯胺T摇匀,室温放置20 min。加入2 m L显色剂摇匀,水浴锅中60℃加热20 min。冷却后放置30 min,在波长558 nm处测吸光值。以羟脯氨酸溶液浓度为横坐标,对应吸光值为纵坐标建立羟脯氨酸标准曲线。