《表1 T0代靶位突变情况分析》

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《应用CRISPR-Cas9基因编辑技术改良传统优质糯稻品种》

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通过农杆菌介导，转化pYLCRISPR/Cas9打靶载体到靖西香糯中，共获得28株转化植株。对转化植株进行阳性检测，发现SD1基因为阳性的转化植株有24株、为野生型的有4株，总突变率为85.7%（图1A；图1B）。靶点1的突变植株有20株，突变率为总突变植株数（24株）的83.3%，其中纯合型突变有17株（占70.8%），杂合型突变仅为3株（占12.5%），纯合突变明显多于杂合突变；靶点2的突变植株18株，突变率为总突变植株数（24株）的75.0%，其中双等位型突变7株（占29.2%），纯合型突变有6株（占25.8%），杂合型突变仅为5株（占20.8%），纯合突变也多于杂合突变；2个靶点都发生突变的有14株，占58.3%（表1）。相比之下，靶点1比靶点2的突变更加高效一些，但第1靶点没发现双等位突变，而第2靶点有较高频率的双等位突变，随着靶点个数的增加，打靶总效率有明显的提高，效果显著（表1；图1C；图1D；图1E）。