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第一章放射性核素示踪技术1

第一节 放射性示踪剂标记技术1

一、生物医学常用放射性核素1

二、示踪剂2

三、放射性核素标记基本技术3

四、蛋白质、多肽的放射性碘标记技术9

五、核苷和核苷酸标记技术14

第二节 放射性核素示踪测量技术18

一、放射性样品测量类型19

二、γ闪烁测量技术20

三、液体闪烁测量技术23

四、契伦科夫辐射测量27

五、双标记及多标记测量方法28

第三节 放射性核素示踪方法29

一、概述29

二、核素稀释法33

三、物质转化的示踪方法35

四、细胞学中的示踪方法37

第四节 药物动力学示踪技术42

一、药物动力学的基本理论42

二、药物动力学示踪技术的基本类型与要求46

三、药物动力学示踪分析举例48

第五节 放射自显影术61

一、放射自显影术的原理61

二、放射自显影的方法62

三、放射自显影的特点66

四、放射自显影的分类67

第六节 放射免疫分析技术69

一、基本原理69

二、基本技术及其进展71

第七节 免疫放射分析技术75

一、基本原理75

二、IRMA法分类76

三、IRMA法基本技术及其进展78

第八节 受体的放射配体结合分析技术81

一、基本原理81

二、基本技术82

三、数据处理88

四、受体的判据91

第九节 酶法放射分析和放射酶促分析法93

一、基本原理94

二、基本技术96

第一节 免疫酶示踪技术的实验基础99

一、示踪酶99

第二章免疫酶示踪技术99

二、示踪酶的免疫标记101

三、免疫酶制剂的质量鉴定103

四、固相载体与固相化处理104

五、免疫酶最适浓度的选择105

六、底物及显色反应105

七、检测结果的判断与分析106

第二节 免疫酶显微示踪技术107

一、基础方法的原理与流程107

二、实际操作中的有关问题109

三、光镜水平的应用与发展111

四、电镜水平的应用与发展112

第三节 免疫酶微量分析技术116

一、技术原理与类型116

二、固相酶标免疫测定117

三、非固相酶标免疫测定125

第四节 免疫酶标原位杂交技术128

第五节 酶标免疫传感技术129

第三章生物素-亲合素系统示踪技术131

第一节 生物素-亲合素系统及其特点131

一、生物素研究趋势与进展131

二、亲合素及其衍生物131

一、生物素的活化及活性生物素结合物的制备133

三、生物素-亲合素系统的特点133

第二节 生物素、亲合素的制备纯化与标记技术133

二、亲合素的提取、纯化与标记技术136

第三节 生物素-亲合素系统的检测方法与原理140

一、BAB法（或BRAB法）140

二、LBA法（或BA法）141

三、ABC法142

四、影响生物素-亲合素系统检测敏感性的因素146

第四节 生物素-亲合素系统的实际应用147

一、抗体形成细胞的BA-Spot-ELISA检测法147

二、BA微量ELISA法测定人血清IgE149

三、放大生物素-亲合素免疫荧光技术（BA-IF）检测细胞表面标志151

四、BAS双染双标记方法确定组织内酶定位的超微结构研究152

五、亲合素-生物素乳凝试验检测病毒抗体153

六、亲合素-葡萄球菌A蛋白ELISA法检测血清中日本脑炎病毒抗体154

七、生物素-亲合素增强免疫斑点法检测甲型肝炎IgM155

八、生物素标记Oligo探针-亲合素磁性球珠分离mRNA(Poly AT tractR mRNA分离系统)156

九、人外周血单个核细胞IL-2Ra的检测157

第四章免疫荧光示踪技术159

第一节 原理159

第二节 常用荧光物质159

一、异硫氰酸荧光黄159

三、四甲基异硫氰基罗丹明160

四、其他荧光物质160

二、四乙基罗丹明160

第三节 常用检测仪器161

一、荧光显微镜161

二、荧光显微镜附件的研究进展162

三、流式细胞分析仪163

四、荧光分光光度计164

五、荧光偏振光分析仪（Abbott TDX 系统）164

第四节 传统免疫荧光技术及其应用164

一、免疫荧光抗体的制备164

二、传统的免疫荧光技术167

三、传统免疫荧光技术的应用169

一、免疫荧光分析技术171

第五节 现代免疫荧光技术及其应用171

二、免疫荧光数学图像处理系统的应用173

三、微球浓缩免疫荧光分析技术的应用-血清白色念珠菌抗体的检测174

四、荧光测定酶免疫分析175

五、荧光偏振免疫分析技术-检测体内药物浓度176

六、底物标记荧光免疫分析-检测血清中的药物浓度176

七、荧光素标记技术检测免疫细胞活性177

八、免疫荧光分析技术检测细胞DNA179

九、荧光原位杂交技术-快速诊断Down氏综合征180

二、探针制备方法182

一、原理182

第一节 铁蛋白标记抗体法182

第五章重金属标记技术182

三、免疫铁蛋白标记的染色法183

第二节 胶体金标记技术184

一、原理和优点184

二、金探针的制备185

三、胶体金探针的应用和前景187

第六章核酸标记与分子杂交技术192

第一节 核酸探针制备193

一、载体194

二、重组DAN200

三、核酸的纯化和分离203

第二节 核酸标记209

一、核酸标记示踪剂—放射性核素210

二、缺口平移211

三、随机引物标记211

四、末端标记212

五、多聚酶链反应（PCR）DNA标记法213

六、36SdCTP 标记DNA-DNA测序216

七、3H dNTP标记探针与染色体原位杂交221

八、实验室中几种简便核酸标记检测法222

九、核酸标记的注意事项224

第三节 核酸分子杂交224

一、核酸杂交原理和参数225

二、液相杂交226

三、固相杂交231

第四节 人体基因探针及筛选240

一、基因组探针及筛选240

二、cDNA文库及探针筛选243

三、显微切割探针库249

四、限制性片段长度多态（RFLP）探针的筛选251

第七章稳定核素示踪技术254

第一节 概述254

一、生物医学中常用的稳定核素254

二、稳定同位素标记物质的命名255

三、同位素示踪技术常用的计算符号256

第二节 稳定核素的富集和分离257

一、基本理论257

二、分离稳定核素的方法260

第三节 稳定同位素标记化合物的制备266

一、化学合成法266

二、同位素交换法268

三、中间体标记法268

四、生物合成法269

第四节 稳定核素及其标记化合物的分析测定270

一、气相色谱—质谱联用法270

二、核磁共振光谱法281

三、红处分光光度法287

第五节 稳定同位素在生物医学中的应用289

一、概述289

四、发射光谱分析法294

二、稳定同位素稀释法299

三、13CO2呼气试验303

四、1?N尿试验309

五、物质代谢转变的研究312

六、稳定同位素体内示踪动力学研究316

七、酶的活力测定328

一、核酸分子的地高辛标记示踪技术334

第一节 半抗原标记示踪技术334

第八章其他标记示踪技术334

二、蛋白质分子的二硝基苯半抗原标记示踪技术340

第二节 稀土元素示踪技术342

一、基本原理342

二、基本技术344

三、TRFIA分析系统346

四、分析中的注意事项347

第三节 化学发光免疫法测定技术347

一、基本原理347

二、基本技术350

三、化学发光免疫分析质量控制356