《神经系统疾病的分子生物学基础》求取 ⇩

上篇2

1. 分子生物学基础及主要研究技术2

1.1 分子生物学的基础知识2

1.1.1 核酸的结构2

1.1.2 基因组与染色质的组织结构9

1.1.3 DNA的复制12

1.1.4 转录作用17

1.1.5 蛋白质的生物合成30

1.2 分子生物学的主要研究技术及其工作原理39

1.2.1 DNA的分离制备39

1.2.2 限制性核酸内切酶40

1.2.3 载体41

1.2.4 基因克隆43

1.2.5 基因文库和eDNA文库构建43

1.2.6 DNA序列分析48

1.2.7分子杂交技术52

2.神经系统发育的分子生物学基础57

2.1 神经系统胚胎发育的基本过程57

2.1.1 诱导57

2.1.2 神经细胞的增殖58

2.1.3 神经细胞的迁移58

2.1.4神经细胞的分化59

2.1.5 神经细胞突触连接的建立与神经元回路的形成62

2.1.6 神经细胞的死亡63

2.1.7 神经胶质细胞的发育64

2.2 脑内基因的表达及其与进化、发育的关系64

2.2.1 脑内神经元基因表达的特点64

2.2.2 脑内神经胶质细胞基因表达的特点65

2.2.3 脑内基因表达与脑进化、发育的关系65

2.3 神经系统发育异常的分子机制65

2.3.1 几种伴有神经系统发育异常的遗传性突变种动物66

2.3.2 与神经系统发育异常有关的人类遗传性神经系统疾病67

3．神经递质受体和离子通道的分子生物学68

3.1 概述68

3.1.1 神经递质68

3.1.2 神经递质受体69

3.2 配体门控通道之一——菸碱样乙酰胆碱受体70

3.2.1 nAchR的分子结构71

3.2.2 nAchR的生理、药理特征73

3.2.3 nAchR的cDNA克隆及表达74

3.2.4 nAchR基因的表达调控75

3.3 配体门控通道之二——几种氨基酸受体76

3.3.1 γ-氨基丁酸A受体76

3.3.2 甘氨酸受体78

3.3.3 兴奋性氨基酸受体79

3.4 G-蛋白偶联受体81

3.4.1基因及其编码产物结构特点81

3.4.2 受体的作用位点82

3.4.3受体的亚型83

3.4.4 哺乳类受体在E-Coli的表达83

3.4.5 R-G家族成员的调节84

3.5 电压门控通道84

3.5.1 钠通道84

3.5.2 钙通道85

3.5.3钾通道85

3.6 参与神经递质代谢的酶86

3.6.1胆碱乙酰基转移酶86

3.6.2 乙酰胆碱脂酶87

4．原癌基因及其在神经系统中的作用89

4.1 癌基因概述89

4.1.1 原癌基因的激活91

4.1.2 原癌基因的生理功能92

4.1.3 原癌基因与细胞分化调节94

4.2 原癌基因在神经系统中的作用95

5．基因诊断的DNA分析——基因图谱法及基因扩增分析进行遗传病的基因诊断98

5.1 基因诊断的一般概述98

5.1.1 基因的变异98

5.1.2 突变99

5.1.3 遗传的异质性100

5.1.4 重组100

5.1.5 基因的连锁性100

5.2 基因图谱法的基本原理102

5.2.1人基因组DNA的分离102

5.2.2 基因特异探针的制备102

5.2.3 限制性内切酶图谱分析103

5.3 基因图谱法进行基因诊断104

5.3.1 用染色体特异探针作基因诊断104

5.3.2 用基因特异探针进行基因诊断108

5.3.3用基因连锁探针及家系分析作基因诊断112

5.3.4 生化基础不明的遗传病的基因诊断114

5.3.5 重复序列基因作图法116

5.3.6 有关基因图谱法技术上的改进116

5.4 应用基因扩增法多聚酶链反应进行遗传病的基因诊断117

5.4.1 应用PCR直接检测点突变117

5.4.2 应用PCR检测基因缺失118

5.4.3 应用PCR作DNA多态性分析120

5.4.4 应用PCR分析基因点突变方法的改进120

6．基因治疗121

6.1 有关基因治疗的一些概念121

6.1.1 基因的保守性与变异性121

6.1.2 病理性基因突变122

6.1.3 基因表达的异常123

6.1.4 基因的转移与整合124

6.1.5随机整合与同源重组124

6.1.6 基因治疗的方式124

6.1.7 性细胞与休细胞的基因治疗125

6.2体细胞加合性基因治疗126

6.2.1 基因转移系统126

6.2.2 转移基因的常用方法126

6.2.3 用于基因治疗的基因转移细胞127

6.2.4 可能进行基因治疗的疾病127

6.3 反转病毒基因转移体系128

6.3.1 反转病毒MomuLV128

6.3.2 MomuLV的基因组结构130

6.3.3 MomuLV对宿主细胞的选择性130

6.3.4 MomuLV用于基因转移的特点131

6.3.5 缺陷的重组反转病毒载体131

6.4 用反转病毒载体进行人类基因治疗137

6.4.1 基本途径137

6.4.2 基因治疗的安全性137

7．神经系统疾病的基因治疗139

7.1 神经系统疾病分子遗传基础研究的进展139

7.2 CNS疾病基因治疗的ex vivo途径140

7.2.1 基因修饰细胞的移植140

7.2.2 骨髓干细胞的移植142

7.2.3 载体扩增细胞的移植142

7.2.4 祖细胞的移植142

7.3 神经系统疾病基因治疗的体内途径142

7.3.1 单纯疱疹病毒载体143

7.3.2腺病毒载体144

7.4 未来瞻望145

下篇147

8．神经遗传病的传统与非传统性遗传方式147

8.1 孟德尔遗传147

8.1.1 常染色体显性遗传148

8.1.2 常染色体隐性遗传148

8.1.3 X连锁显性遗传148

8.1.4 X连锁隐性遗传148

8.1.5 Lyon学说149

8.2 非传统性的遗传方式149

8.2.1 细胞质遗传149

8.2.2 嵌合体150

8.2.3 单亲？体150

8.2.4 基因组印迹151

9． 苯酮尿症155

9.1 苯酮尿症的临床概述155

9.2 苯丙氨酸羟化酶基因的分离155

9.3 产前诊断156

9.4 群体遗传学158

9.5 没有先证者的携带者检测162

9.6 临床应用163

9.7 体细胞的基因治疗163

10．亨廷顿病165

10.1 亨廷顿病的临床概述165

10.1.1 亨廷顿病的临床表现165

10.1.2亨廷顿病的诊断和鉴别诊断166

10.1.3 亨廷顿病的病理改变166

10.1.4 亨廷顿病的治疗166

10.2 亨廷顿病的生物化学改变166

10.2.1 微量元素和过氧化物酶166

10.2.2 氨基酸167

10.2.3 蛋白质和多肽167

10.2.4 神经递质168

10.3 亨廷顿病的遗传学168

10.3.1 亨廷顿病患者家系的连锁分析和DNA标志物G8（D4S10）169

10.3.2 D4S10的精确定位170

10.3.3 亨廷顿病遗传学研究的新进展172

11 阿耳茨海默病174

11.1 阿耳茨海默病的临床概述174

11.1.1 阿耳茨海默病的临床表现174

11.1.2 阿耳茨海默病的诊断和鉴别诊断174

11.1.3 阿耳茨海默病的病理改变174

11.1.4 阿耳茨海默病的治疗174

11.2阿耳茨海默病的生物化学和分子病理175

11.2.1乙酰胆碱及其它神经递质的异常175

11.2.2 淀粉样蛋白原纤维和它的前体175

11.2.3双股螺旋状微丝175

11.3 阿耳茨海默病的遗传学研究176

11.3.1 淀粉样蛋白基因定位和第21对染色体在阿耳茨海默病因学中的作用176

11.3.2 阿耳茨海默病与第19对染色体177

12. 线粒体肌病和脑肌病179

12.1 线粒体DNA的特异性及其遗传方式179

12.2 线粒体肌病和脑肌病的临床概述181

12.2.1 线粒体肌病181

12.2.2 进行性眼外肌瘫痪181

12.2.3 Pearson综合征181

12.2.4 MERRF181

12.2.5 MELAS181

12.2.6 其它线粒体肌病181

12.2.7 其它伴有mt DNA缺陷的疾病182

12.2.8 其它推断性线粒体疾病182

12.3 线粒体肌病的分子遗传学研究182

12.3.1 线粒体肌病和脑肌病的生化分类183

12.3.2 线粒体肌病和脑肌病的线粒体基因组缺陷分类184

13. 遗传性共济失调186

13.1 遗传性共济失调的临床分类186

13.2 已知代谢缺陷的共济失调188

13.2.1 维生素E缺陷188

13.2.2 胆甾烷醇沉积症188

13.2.3谷氨酸脱氢酶缺陷188

13.2.4 其它酶缺陷189

13.2.5 GM2神经节苷酯沉积症189

13.3 未知原因的共济失调189

13.3.1 早发性共济失调189

13.3.2 晚发性共济失调189

14. 神经肌肉病192

14.1 假肥大型肌营养不良192

14.1.1 DMD/BMD的临床概述192

14.1.2 DMD/BMD的分子遗传学研究192

14.1.3 DMD/BMD的临床基因诊断196

14.1.4 DMD/BMD的基因治疗197

14.2 强直性肌营养不良198

14.2.1强直性肌营养不良的临床概述198

14.2.2 强直性肌营养不良的生物化学概述198

14.2.3 强直性肌营养不良的分子遗传学研究198

14.3 家族性淀粉样变性多神经病202

14.3.1临床概述与病理改变202

14.3.2 其它遗传性淀粉样变性205

14.3.3 病因学及分子生物学研究205

14.3.4 发病机理的分子生物学研究207

14.3.5 分类建议208

14.3.6 小结209

14.4 遗传性运动感觉性神经病（HMSN）209

14.4.1 临床概述210

14.4.2 分子遗传学研究211

14.4.3 遗传咨询213

14.4.4 治疗213

15. 癫痫214

15.1 癫痫的临床概述214

15.1.1 概述214

15.1.2 几种特发性癫痫的临床简介215

15.2 癫痫的分子遗传学216

15.2.1 双胎与家系研究217

15.2.2 特发性全身性癫痫的基因图谱217

15.2.3 少年性肌阵挛癫痫的基因图谱研究217

15.2.4 良性家族性新生儿惊厥的基因图谱研究225

15.2.5 候选基因226

15.3人类癫痫分子遗传学研究的近况与瞻望227

16. X连锁智力低下229

16.1智力低下(MR)及X连锁智力低下(XLMR)的临床概述229

16.1.1 MR的定义及分类229

16.1.2XLMR的临床及分类229

16.1.3 Fra-XS229

16.2 XLMR的分子生物学研究231

16.3 XLMR的分子遗传学研究232

16.3.1 Fra-XS的分子遗传学研究232

16.3.2 XLMR的分子遗传学研究234

16.4 XLMR的产前诊断、携带者检出及遗传咨询235

16.5 Fra-XS的临床基因诊断研究进展236

17. 神经纤维瘤病238

17.1 临床概述238

17.2 NF-1的分子生物学研究239

17.2.1 NF-1基因239

17.2.2 NF-1蛋白242

17.3 NF-1临床基因诊断242

17.4治疗242

18. 肝豆状核变性243

18.1 肝豆状核变性WD的临床概述243

18.1.1 WD的实验室检查244

18.1.2 WD的治疗244

18.2 WD的分子生物学研究244

18.3 WD的基因诊断247

18.3.1 产前诊断248

18.3.2 症前诊断248

附录A 基因分析的常用方法250

A1 染色体DNA的提取250

A1.1 由外周血(骨髓)提取DNA250

A1.2 脾、肝及胎盘DNA的提取250

A1.3 由培养细胞中提取DNA250

A2 细胞总RNA的提取251

A3 重组质粒的转化251

A4 质粒DNA的提取251

A5 DNA片段的回收252

A6 DNA标记探针的制备253

A6.1 缺口半移法标记DNA253

A6.2 随机引物法标记DNA253

A6.3 5末端32P标记寡核苷酸253

A6.4 3末端生物素标记寡核苷酸253

A6.5 光生物素标记DNA253

A7 DNA杂交分析254

A7.1 DNA斑点杂交254

A7.2 Southern印迹杂交254

A7.3 HRP标记DNA探针Southern印迹杂交255

A8 RNA分析255

A8.1 RNA斑点杂交255

A8.2 Northern印迹杂交256

A8.3 SP6 RNase 保护测定256

A9 聚合酶链反应(PCR)256

A9.1 基因组DNA扩增256

A9.2 反转录聚合酶链反应(RNA-PCR扩增)256

A9.3 聚合酶链反应/单链构型多态性分析(PCR/SSCP)257

A9.4 聚合酶链反应/序列特异的寡核苷酸探针杂交(PCR/SSOPH)257