《组织培养技术》

第一章绪论1

1-1各种培养法的种类1

1-2培养方法的发展1

1-3培养基的种类2

1-4初代培养（primary culture）3

1-5株化细胞（established cell line）4

1-6培养细胞的功能5

1-7培养方法的应用5

第二章培养前的准备及基本知识7

2-1设备、仪器7

2-1-1无菌室、无菌操作枱（laminar flow）无菌箱7

2-1-2仪器类8

2-1-3器具类9

2-2器具等之清洗及灭菌11

2-2-1清洗11

2-2-2灭菌12

2-3培养基（medium）及各科溶液类14

2-3-1天然培养基（natural media）14

2-3-2人工培养基（synthetic media）15

2-3-3增殖培养基（growth media）15

2-3-4维持培养基（maintenance media）15

2-3-5培养基类之灭菌15

2-3-6培养基类之试验16

2-3-7盐类溶液（balanced salt solution；BSS）16

2-3-80.2001CE438henol red溶液19

2-3-9 7.5%碳酸氢钠（N aHCO3 ）溶液19

2-3-10 0.25%胰蛋白酶（trypsin）溶液19

2-3-11 2%中性的EDTA （ethylene diamine tetraacetic acid）19

2-3-12人工培养基（synthetic media）之配法19

2-4无菌操作法（aseptic techniques）21

第三章基本技术26

3-1细胞计算法26

3-2细胞之继代培养法29

3-3增殖曲线（growth curve）31

3-4形态观察法33

3-5染色体标本制作法36

3-6群落（colony）形成法40

3-7软琼脂（softagar）内群落（colony）形成法42

3-8移植片培养法-鸡胚胎心脏片之培养43

3-9初代细胞分散培养法47

3-10冷冻保存法49

第四章化学、物理性实验法53

4-11细胞分划法53

4-12 DNA、RNA，蛋白质定量法57

4-13放射性先躯物质之吸收法63

4-14利用比色法来做酵素活性之测定法66

4-15同位素之酵素测定法68

第五章各种培养技术73

5-16 S期之同步培养法73

5-17 M期之同步培养法79

5-18细胞融合及杂种细胞形成法81

5-19大量培养法（mass culture）85

第六章培养内功能、分化的发现87

6-20肾上腺肿瘤株化细胞之甾类激素（steroid hormone）87

6-21肝癌株化细胞中之酪氨酸转氨酶（tyrosine aminotransferase ；TAT）之诱导90

6-22 Friend白血病细胞之分化92

第七章各科器官的细胞培养法95

7-23肝细胞的培养法95

7-24肾脏细胞的培养法99

7-25脑细胞的培养法102

7-26 胰岛细胞的培养法106

7-27骨髓细胞的培养法111

7-28软骨细胞的培养法115

7-29器官培养法-鸡胚胎大腿骨的器官培养117

第八章人体细胞之培养法121

8-30人体双倍体纤维芽细胞的培养法121

8-31人体皮肤角化细胞的培养法125

8-32人体癌症细胞的培养法129

第九章病毒实验法135

9-33病毒感染所引起的细胞形态变化之观学135

9-34以细胞病变效应（CPE）来定量分析单纯疱疹病毒（Simple Herpes Virus）137

9-35以病毒斑法来定量研究单纯疱疹病毒141

9-36人体血清中之抗单纯疱疹病毒抗体之测定143

9-37 SV40所引起的培养细胞之性状转变145

9-38脊髓灰质炎病毒（pol iovi rus）之分离与鉴定148

第十章免疫实验法152

10-39小白鼠的抗原专一性淋巴球之幼小化反应（blastogenesis）152

10-40小白鼠淋巴球细胞之抗体产生检验法155

10-41人体淋巴球之分离培养法157

10-42人体之T淋巴球，B淋巴球之分离测定法159

10-43融合瘤（hybr idoma）形成法161

第十一章毒性及遗传毒性检查法168

11-44化学物质的简易毒性试验法（改变Panel法）168

11-45染色体异常试验法173

11-46不定期DNA合成试验法179

11-47姊妹染色体互换试验法181

11-48突变实验法185

11-49试管内致癌实验法（用C3H10T 1/2细胞的病灶法）188

11-50辐射线效果测定法193

附录199

附录1质菌属（mycoplasma）检验法199

附录2统计处理法205

附录3工作记录的写法213

附录4培养基的组成219

附录5株化细胞223

附录6染色法229

附录7闪烁计数液（scintillator）235

附录8显微镜观察237

附录9显微照相与照片的冲洗法239

参考文献241

后记245

资料部分247

索引293