《组织培养和分子细胞学技术》求取 ⇩

第一篇组织培养技术3

第一章绪论和基本理论知识鄂征3

第一节绪论3

一、组织培养基本概念3

二、对组织培养的评价5

三、组织培养发展简史5

第二节组织培养细胞生物学9

一、体内外细胞的差异和分化9

二、培养细胞形态分类11

三、培养细胞形态结构14

四、组织培养细胞的生长和增殖过程16

五、培养细胞增殖动力学20

六、组织培养细胞遗传学特征23

七、细胞和细胞、细胞和基质的相互关系26

第三节培养细胞生存环境、条件和代谢26

一、无污染环境26

二、温度26

三、气体环境和氢离子浓度27

四、体外培养细胞生存所需基本物质28

五、渗透压31

六、培养基31

七、附着底物32

八、抑制细胞生长因素32

九、细胞代谢和调控32

第四节体外培养细胞成功率的分析35

一、组织和细胞供体年龄35

二、培养条件35

三、贴附底物36

四、培养方法36

第五节建立细胞系或细胞株36

一、体外培养细胞的种类和命名36

二、建立细胞系（或株）的要求38

三、已建立细胞系或株的鉴定、管理和使用38

第二章组织培养设施和基本条件徐新来 鄂征40

第一节 实验室设计40

第二节无菌操作设施和工作间40

一、净化工作台40

二、无菌操作室41

三、无菌操作箱42

四、清洗和准备区43

五、温育和贮存区43

六、观察和研究区43

第三节实验室设备43

一、电热恒温箱43

二、电热干燥箱43

三、冰箱44

四、显微镜44

五、水纯化装置44

六、洗刷装置44

七、抽滤装置44

八、细胞冷冻贮存器45

九、离心机45

十、天平46

十一、加样器46

第四节 器械47

第五节培养器皿47

一、玻璃瓶皿47

二、塑料瓶皿48

第三章培养用液徐新来 鄂征50

第一节水和平衡盐溶液51

一、水51

二、平衡盐溶液51

第二节天然培养基52

一、鸡血浆的制备52

二、鸡胚浸出液的制备53

三、血清54

四、水解乳蛋白56

五、胶原56

第三节合成培养基56

一、合成培养基的种类57

二、合成培养基的成分61

三、合成培养液的配制62

四、无血清培养基63

第四节培养基的选择67

一、经验法67

二、实验法68

第五节其它常用液68

一、消化液68

二、pH调整液69

三、抗生素液70

第四章清洗与消毒鄂征 徐新来71

第一节清洗71

一、玻璃器皿的清洗71

二、胶塞的清洗74

三、塑料器皿的清洗74

四、包装74

第二节消毒74

一、物理消毒法75

二、化学消毒法76

三、抗生素消毒（灭菌）76

第五章基本培养技术鄂征78

第一节组织培养的基本操作和培养技术78

一、培养操作基本要领和要求78

二、基本培养操作技术79

第二节常规组织培养法92

一、天然培养基组织培养法92

二、人工合成培养基组织培养法92

第三节特殊培养法98

一、二倍体细胞培养法98

二、加支持物培养法100

三、单细胞分离（克隆）培养100

四、球体细胞培养107

五、微载体细胞培养法徐新来109

六、悬浮培养法鄂征111

第六章组织培养的污染、检测和排除鄂征 徐新来112

第一节 污染途径112

第二节污染对细胞的影响113

一、真菌污染113

二、细菌污染114

三、支原体污染114

第三节微生物污染的排除117

一、抗生素除菌法117

二、加温除菌法118

三、动物体内接种除菌法118

四、巨噬细胞吞噬法118

第七章个别细胞和组织的培养鄂征120

第一节正常细胞培养120

一、上皮细胞类培养121

二、结缔组织类细胞培养128

三、肌组织细胞培养131

四、神经组织细胞培养132

第二节肿瘤细胞培养133

一、组织培养肿瘤细胞生物学特性133

二、培养方法134

第八章组织培养细胞性状生物学检测鄂征139

第一节细胞一般形态学观察法139

一、固定细胞观察法139

二、电子显微镜（电镜）观察法143

第二节免疫细胞化学技术观察细胞成分法李吉友144

一、原理144

二、标本制备及固定145

三、染色方法146

第三节活细胞直接观察方法鄂征150

一、相差观察和摄影150

二、缩时显微摄电影和闭路电视记录151

第四节培养细胞生物学性状检测151

一、细胞培养常规检查151

二、细胞生物学性状检测153

第九章细胞遗传学性状检测鄂征162

第一节性染色质检测162

一、原理162

二、方法162

第二节培养细胞染色体显示法164

一、原理164

二、传代培养细胞染色体显示法165

三、人末梢血微量全血培养染色体显示法167

四、羊水细胞培养169

第三节染色体结构显示和检测170

一、染色体显带170

二、姐妹染色单体分化染色172

三、染色体脆性位点的检测174

四、微核检测（陈泉光）175

五、非程序DNA合成检测（UDS）176

第四节染色体基因定位鄂征178

一、原理178

二、染色体原位杂交基因定位技术吕有勇 鄂征179

第五节染色体显微切割法186

一、原理186

二、方法187

第十章组织培养细胞工程技术鄂征190

第一节建立突变细胞系190

一、原理190

二、方法191

第二节细胞融合陈泉光 鄂征193

一、原理193

二、聚乙二醇融合法193

第三节细胞脱核法鄂征198

一、原理198

二、方法199

第四节 细胞同步化法199

第十一章组织培养在实验研究中的应用鄂征202

第一节组织培养药物测试202

一、细胞选择203

二、检测药物204

第二节细胞培养在杂交瘤技术中的应用徐新来207

一、原理207

二、杂交瘤细胞的制备209

三、单克隆抗体的大量制备214

第三节酶联免疫技术（ELISA）检测抗体法万文徽214

一、原理214

二、方法214

三、实验室中几种酶联免疫测定方式及其用途219

第十二章体外培养细胞的转化和DNA转导技术鄂征220

第一节基本概念和原理220

一、细胞转化与恶变220

二、细胞转化基本过程221

第二节诱变因素诱发培养细胞转化的程序222

一、细胞的选择222

二、诱发培养细胞的转化224

三、转化细胞的检测225

第三节几种常用转化细胞和转化技术226

一、致癌化学物转化细胞226

二、病毒转化细胞226

三、癌基因转化细胞228

第四节基因细胞内导入技术228

一、基因导入的概念、生物学意义和技术要点甄理达 鄂征228

二、技术方法甄理达 鄂征 吕有勇230

三、转基因技术鄂征242

第二篇分子细胞学技术253

第十三章分子细胞学基本理论知识鄂征253

第一节分子细胞学技术基本理论知识253

一、细胞和基因253

二、RNA生物学性状260

三、遗传和变异261

第二节细胞基因工程概要262

一、细胞基因工程原理262

二、培养细胞和细胞基因工程262

三、分子细胞学实验安全知识262

第十四章分子细胞学实验室基本设备、技术原理和常规技术操作鄂征264

第一节基本设备条件鄂征264

一、培养设备264

二、灭菌设备264

三、塑料和玻璃制品264

四、小型仪器设备265

五、离心机265

六、电泳设备265

七、高级仪器设备265

八、专用操作间266

第二节细胞中大分子的分离、纯化等常规技术266

一、层析分离法266

二、核酸提取法柯杨 鄂征271

三、电泳技术李振甫 鄂征280

四、细菌培养技术鄂征289

五、噬菌体的培养、滴定和保存297

第三节细胞基因工程生物工具（工具酶、质粒和噬菌体）299

一、工具酶299

二、载体309

三、核素探针标记技术324

四、非放射性标记法338

第十五章细胞基因工程341

第一节DNA物理图谱和DNA分子体外连接（重组）张青云 张建明341

一、DNA物理图谱341

二、DNA体外连接346

三、影响连接相关因素353

四、重组子转化和扩增354

第二节基因克隆鄂征357

一、基因组文库法357

二、cDNA文库368

第三节细胞外基因扩增邓国仁 何洛文 张青云 李诤376

一、PCR原理376

二、PCR条件的要求和建立376

三、PCR最适条件的选择381

四、PCR方法381

五、PCR产物分析方法382

六、PCR技术的应用383

第四节未知基因的探查李华385

一、差减cDNA文库法385

二、差异显示法392

第五节同源重组基因打靶鄂征395

一、同源重组纲要395

二、同源重组技术方法400

第十六章培养细胞基因性状探查和表达的检测412

第一节DNA（基因）探查检测柯杨412

一、Southern Blot412

二、点迹印迹杂交416

第二节培养细胞中RNA的检测419

一、甲醛胶电泳分离RNA及Northern Blot的基本原理419

二、方法420

第三节蛋白质检测（Western Blot）421

一、专用设备及试剂422

二、方法422

第四节基因性状的其它检测方法鄂征423

一、基因长度多态性（RFLP）检测423

二、基因遗传变异检测427

第五节DNA序列分析蔡红427

一、基本原理427

二、DNA测序技术428

第十七章分子细胞学技术在研究中的应用436

第一节抗癌药物耐药性的检测韩复生 张霆钧436

一、原理436

二、多药耐药性检测方法438

三、DNA拓扑异构酶的检测443

四、谷胱苷肽（GSH）及其转移酶的检测450

第二节基因诊断和治疗技术鄂征452

一、关于基因诊断和治疗452

二、基因诊断和治疗的理论基础453

三、基因诊断454

四、基因治疗457

附录463

一、常用缩写词463

二、重要名词释义466

三、人和动物的主要细胞系（株）473

四、基本单位和数据478

五、核酸数据482

六、氨基酸和蛋白质数据485

七、杂用干液487

八、常用缓冲液488

九、酸和碱数据494

十、常用层析数据495

十一、培养基497

十二、载体501

十三、细菌菌株一览表502

十四、常用大肠杆菌菌株遗传标记505

参考文献507

《组织培养和分子细胞学技术》中文索引508