《表1 引物序列：鸭瘟病毒疫苗株UL44.5和UL44基因间隔区作为复制非必需区的鉴定》

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《鸭瘟病毒疫苗株UL44.5和UL44基因间隔区作为复制非必需区的鉴定》

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根据RFP基因（M96064.1），设计扩增引物RFP-F/R（表1），本实验所用引物均由擎科生物技术有限公司合成。以p Dsred2-N1为模板，采用引物RFP-F/R扩增含有RFP的目的基因。PCR反应条件为:98℃30 s；98℃10 s、56℃30 s、72℃2 min，35个循环；72℃2 min。胶回收纯化后即获得含有RFP的目的基因。利用Eco R V酶切后将其连接至p ENTR-SV40质粒中，构建重组质粒p ENTR-SV40-RFP。以RFP-F/R为引物，通过PCR和测序鉴定该重组质粒。